gabinety rehabilitacyjne warszawa

Przy wyższej dawce (105 PFU MCMV), wszystkie myszy MIP-1 + + przeżyły, a wszystkie MIP-1. myszy zmarły w dniu 5. Tak więc, brak MIP-1. dogłębnie zwiększona podatność na MCMV. Jako MIP-1 myszy miały układową i śledzioną IFN-y odpowiedzi, wrażliwości wynikające z całkowitego braku IFN-y (tj. myszy IFN-y) i podwójny niedobór wynikający z braku obu IFN-y i MIP-1. (tj. myszy IFN-y MIP-1A2) porównywano z tym uzyskanym z pojedynczego MIP-1. niedobór. Obciążenia wirusowe w przedziałach tkankowych były podobne w zakażeniu MCMV we wszystkich 3 grupach z niedoborem myszy (Figura 3, aib). Co więcej, wszyscy oni ulegli śmiercionośnym skutkom infekcji 105 PFU MCMV w dniu 5 (Figura 3c). Wszystkie myszy przeżyły infekcję małymi dawkami (104 PFU) MCMV (dane nie pokazane). Te wyniki pokazują, że MIP-1 jest krytyczny i tak samo ważny jak IFN-y do przetrwania w tych warunkach. Ponadto wyniki sugerują, że lokalny IFN-y produkcja jest niezbędna, ale systemowa IFN-y odpowiedzi są niewystarczające do ochrony przed infekcją. Rysunek 3 Wpływ MIP-1. i IFN-y na odporność na MCMV. (aib) MIP-1 (3 +, MIP-1A, IFN-y2). (IFN-y) i MIP-1. IFN-. myszy były niezakażone lub zakażone 5 x 104 PFU MCMV we wskazanych czasach. Śledziona (a) i wątroby (b) zebrano i homogenizowano w celu oznaczenia miana wirusa, jak opisano w Metodach. Granica wykrywalności dla testu wynosiła 2 log PFU na gram tkanki. Znaczy . SE (n = 3) są pokazane. (c) Myszy były niezainfekowane lub zakażone MCMV o stężeniu 105 PFU (wysoka dawka) i monitorowane dwa razy dziennie w celu przeżycia. Wyniki reprezentują z co najmniej 2 eksperymentów. Przedstawione dane reprezentują średnią. SE (n = 6). Indukcja ekspresji MIG w wątrobie. Ekspresję Mig oceniano w celu oceny dalszych efektów komórek MIP-1 (3, NK i miejscowego względem układowego IFN-y. Całkowity RNA wytworzono z wątroby niezakażonych lub zainfekowanych MCMV MIP-1 (3 + i MIP-1. myszy przez 36, 48 lub 72 godziny. Wątroby RNA z IFN- myszy zainfekowane przez 48 godzin wykorzystano do udokumentowania IFN-y wymaganie. Aby ocenić wkład komórek NK w wątrobę IFN-y i ekspresję Migi, RNA przygotowano także z niezakażonych lub zainfekowanych immunokompetentnych myszy C57BL / 6 z niedoborem C i B-komórkowego C57BL / 6-SCID; myszy te były traktowane przeciwciałem kontrolnym lub komórka NK zubożona przez traktowanie przeciwciałami anty-NK1.1 lub anty-AGM1. Analizy Northern blot ujawniły ponad 200-krotną indukcję Mig w stosunku do ekspresji mRNA GAPDH w 36 godzin po infekcji zarówno w MIP-1 (3 +, jak i MIP-1. myszy (Figura 4a). Przeciwnie, po 48 godzinach ekspresja genu Mig utrzymywała się w MIP-1 (3 +, ale była poniżej poziomu wykrywalności w MIP-1. myszy (Figura 4a). Rycina 4 Wymagania dla IFN-y i ekspresja genu Mig. (aib) RNA z wątroby wyizolowano z MIP-1 (3 +, MIP-1 (3- lub IFN-y. myszy niezakażonych lub zainfekowanych MCMV. (a) Całkowity RNA analizowano przez hybrydyzację Northern blot. Wyniki reprezentują z 3 eksperymentów. (b) Względny ilościowy RT-PCR przeprowadzono z Competimers dla 18-S rRNA jako kontrolą wewnętrzną. (c) Całkowitą wątrobową RNA przygotowano z MIP-1 (3 + i MIP-1. myszy podawano kontrolne IgG (oznaczone jako C) lub anty-CD3 (a-CD3) na 3 godziny przed zbiorem. RNA przygotowano i analizowano za pomocą względnej ilościowej RT-PCR, jak powyżej. (d) Wirusowy RNA izolowano z myszy, które były niezakażone lub zakażone MCMV, z ubytkami komórek NK lub bez nich. Myszami były myszy C57BL / 6 lub C57BL / 6-SCID traktowane kontrolnymi IgG (oznaczonymi jako C), anty-NK1.1 lub anty-AGM1 24 godziny przed zakażeniem. RNA analizowano za pomocą względnej ilościowej RT-PCR, jak powyżej. b) d przedstawiają barwiony żelem bromek etydyny zamplifikowanych produktów, reprezentujący z 3 eksperymentów (patrz Tabela dla ilościowego oznaczania wyników i Metody dla szczegółów procedur). Aby zwiększyć czułość wykrywania i skorelować IFN-y z ekspresją Mig zastosowano względną RT-PCR do oznaczenia ilościowego
[podobne: luivac opinie, zagorz pl, karty invizimals ]